本發(fā)明公開(kāi)了一種體外收集Midkine蛋白并用于處理細胞的方法,培養高表達Midkine蛋白的細胞,利用Midkine蛋白的分泌特性,在培養基中收集Midkine蛋白,利用Western blot實(shí)驗檢測Midkine蛋白分泌量;通過(guò)Western blot實(shí)驗檢測發(fā)現MK蛋白可以轉運至細胞內,并抑制AMPK的磷酸化水平;在細胞外施加Midkine蛋白的同時(shí)加入肝素(heparin),通過(guò)Western blot實(shí)驗檢測發(fā)現Heparin抑制了Midkine蛋白進(jìn)入細胞,并提高了AMPK蛋白的活性。本方法為研究Midkine的作用機制提供了新方法。
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