本發(fā)明涉及一種基于孔板的高通量蛋白質(zhì)樣品預處理方法,是一種集蛋白質(zhì)提取、變性、還原、烷基化、除鹽以及酶解的為一體的方法。需要順序使用預處理孔板Ⅰ和預處理孔板Ⅱ。生物樣品首先加入預處理孔板Ⅰ中,進(jìn)行蛋白質(zhì)提取,變性和還原處理,這是由于上述操作的條件比較苛刻,可能會(huì )破壞預處理孔板Ⅱ;然后再將樣品溶液轉移到預處理孔板Ⅱ中進(jìn)行烷基化捕獲蛋白質(zhì)、除鹽以及酶解處理。酶解產(chǎn)生的肽段可以進(jìn)行質(zhì)譜檢測。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是將蛋白質(zhì)樣品預處理過(guò)程集成在孔板中進(jìn)行,可同時(shí)處理24?384個(gè)樣品。此外,在提取過(guò)程中使用細胞裂解酶(如溶菌酶、酵母溶壁)和強提取溶劑(如SDS、離子液體)大大提高微生物蛋白質(zhì)的提取效率。
院屬單位：中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
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